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骨桥蛋白对人牙髓干细胞成骨分化的旁分泌作用

发布时间:2020-07-13 12:25:57 阅读: 来源:船板厂家

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近日,哈尔滨医科大学附属第二医院口腔修复科研究人员发表论文,旨在研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对牙髓干细胞(dentalpulpstemcells,DPSCs)成骨分化的旁分泌作用。研究指出,OPN对DPSCs的旁分泌作用是促进其成骨向分化。该文发表在2014年第11期《口腔医学研究》杂志上。

利用四甲基偶氮唑盐(MTT)计数测定不同浓度OPN对细胞增殖的影响;测定DPSCs经不同浓度OPN诱导后的碱性磷酸酶(ALP)活性;选取适宜的诱导浓度,在倒置相差显微镜下观察诱导后的DPSCs形态变化;应用茜素红染色法检测矿化结节的形成;采用反转录聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-RCR)分别检测DPSCs骨涎蛋白(BSP)、Runt相关转录因子2(Runx-2)、骨钙蛋白(OCN)、Ⅰ型胶原(Col-1)等骨源性基因表达情况。

MTT计数及ALP活性测定实验表明,随着OPN浓度增加,ALP活性增强,但细胞增殖率降低。茜素红染色显示OPN诱导培养28d后出现矿化结节。OPN诱导培养7d后DPSCs骨源性基因表达均成阳性。其中BSP、Runx-2、Col-1及OCN等基因表达水平均明显高于对照组。

(实习编辑:徐润兰)

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